免疫印跡(immunblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(western blot),他是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。
western blot是在凝膠電泳和固相載體測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相**測(cè)定的高特異性和敏感性,現(xiàn)在已成為蛋白分選的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡(western blot)常用于鑒定某種蛋白,并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分選。
western blot一般步驟:蛋白質(zhì)抽提,蛋白質(zhì)定量,變性聚丙稀酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE),蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移,western blot膜的封閉和抗體孵育,western blot結(jié)果檢測(cè),western blot數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。