革蘭氏染色液/細(xì)胞染色液
【革蘭氏染色液染色原理】分泌物中的革蘭氏細(xì)菌含有多種氨基酸,具有酸堿化學(xué)物質(zhì),且?guī)в胁煌碾姾?,與革蘭氏染色液中的酸堿化學(xué)物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng),與革蘭氏染色液中不同電荷的染料結(jié)合,從而使分泌物中的革蘭氏細(xì)菌染成不同的顏色。
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【革蘭氏染色液主要組成成份】結(jié)晶紫、草酸銨、碘、碘化鉀、堿性復(fù)紅、石炭酸和酒精。
【革蘭氏染色液貯存條件】常溫保存。
【有效期】24個(gè)月。
【樣本要求】革蘭氏細(xì)菌的涂片。
【染色方法】
1、將結(jié)晶紫染色液滴加在已固定的涂片上,以覆蓋涂片為宜,染1分鐘,水洗。
2、滴加碘液,以覆蓋涂片為宜,染1分鐘,水洗。
3、滴加95%酒精脫色,以覆蓋涂片為宜,搖動(dòng)玻片至紫色不再為酒精脫退為止,水洗。
4、滴加石炭酸復(fù)紅染色液,以覆蓋涂片為宜,復(fù)染60秒鐘,水洗。
5、待干后用油鏡觀察。
【結(jié)果判定】革蘭氏陽(yáng)性菌被染后呈現(xiàn)紫色,革蘭氏陰性菌被染后呈現(xiàn)紅色。
【染色結(jié)果的解釋】革蘭氏染色液只對(duì)樣本進(jìn)行染色,樣本存在異常操作人員要根據(jù)染色結(jié)果并結(jié)合細(xì)菌形態(tài)特征進(jìn)行判別。
【染色方法的局限性】染色過(guò)程為人工染色,容易產(chǎn)生染色偏差。
【革蘭氏染色液注意事項(xiàng)】
1、涂片厚薄適宜,固定后方可染色。
2、所加染液以覆蓋涂片為宜,不能過(guò)少,以免蒸發(fā)而染料沉淀。
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