westernblot顯色底物是化學發(fā)光底物,顯示方法有膠片(壓片)法和化學發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)。
膠片法需要暗房,X光膠片,配置顯影液、定影液,然后進行壓片、顯影、定影,要得到一個比較理想的圖片,往往需要重復壓片幾次,操作非常繁瑣,而且需要耗材。
化學發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)則超越了膠片法,不需要暗房、壓片,關鍵的條帶不會因為曝光不足或者曝光過度而丟失,而且該方法無耗材,圖片結果為電子文檔,方便存檔和長期保存。
化學發(fā)光(熒光)成像系統(tǒng)專用冷CCD相機系列,與普通凝膠成像系統(tǒng)相比,其特點體現(xiàn)在:
1)高靈敏度CCD芯片:采用化學發(fā)光成像系統(tǒng)通用的高靈敏度CCD芯片。
2)高動態(tài)范圍:CCD芯片選定后,相機的動態(tài)范圍就由AD轉(zhuǎn)換器決定,國際知名的化學發(fā)光成像系統(tǒng)均采用了16bitAD轉(zhuǎn)換,而12bit的相機用于凝膠成像沒問題,用于化學發(fā)光就不合適了。
3)低噪音:相機產(chǎn)生的噪音有二種,分別是熱噪音和讀出噪音,在降低熱噪音方面,通過多級半導體制冷,使CCD芯片溫度低于環(huán)境溫度50°C左右,且溫度可控,控溫精度為±0.2°C,并可控制半導體制冷開關和風扇開關;在降低讀出噪音方面,通常采用低噪音的16位A/D轉(zhuǎn)換,同時反復優(yōu)化電路設計,降低噪音。