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番紅 0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅 O 結(jié)合呈現(xiàn)紅色， 嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍色，與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明，從而將軟骨 組織和骨組織區(qū)分開。
番紅 O 是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料，其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團（硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素）結(jié)合。番紅 O 著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當軟骨受到損傷時，軟骨中的糖蛋白會釋放出來，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導致番紅 O 淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對番紅 O 染色的軟骨基質(zhì)進行定量分析。固綠與膠原纖維結(jié)合，不宜褪色。番紅O-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過度易導致切片不著色，分化不足易導致切片著色過深。
