ZF-2013型大腸埃希氏菌熒光觀察箱
366nm暗箱式檢測用紫外燈, 用于水及食物中的微生物檢測,如水中大腸埃希氏菌在含MUG 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后,即會產(chǎn)生熒光反應(yīng)也可用于實驗室蛋白質(zhì)及化合物的檢測。
大腸埃希氏菌定義
大腸埃希氏菌是指能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色,能產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide)使培養(yǎng)液在波長366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的細菌。
二、用途 :大腸埃希氏菌測定熒光觀察使用方法:插上電源,將經(jīng)過24小時培養(yǎng)后的EC-MUG管在燈下照射,如有藍色熒光產(chǎn)生則為大腸埃希氏菌陽性管;
四、具體方法:取供試液10ml(相當(dāng)于供試品1g、1ml),直接或處理后接種至適量(不少于100ml)的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中,培養(yǎng)18--24小時,必要時可延長至48小時.
取上述培養(yǎng)物0.2ml,接種至含5mlMUG培養(yǎng)基的試管內(nèi),培養(yǎng),于5小時、24小時在366nm紫外線下觀察,同時用未接種的MUG培養(yǎng)基作本底對照.若管內(nèi)培養(yǎng)物呈現(xiàn)熒光,為MUG陽性,不呈現(xiàn)熒光,為MUG陰性.觀察后,沿培養(yǎng)管的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液,液面呈玫瑰紅色,為靛基質(zhì)陽性,呈試劑本色,為靛基持陰性.本底對照應(yīng)為MUG陰性和靛基質(zhì)陰性.
如MUG陽性,靛基質(zhì)陽性,判供試品檢出大腸埃希菌;如MUG陰性,靛基質(zhì)陰性,判供試品未檢出大腸埃希菌;如MUG陽性,靛基質(zhì)陰性,或MUG陰性,靛基質(zhì)陽性,則應(yīng)取膽鹽乳糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的平板上,培養(yǎng)18--24小時.
若平板上無菌落生長,或生長的菌落與表所列的菌落形態(tài)特征不符,判供試品未檢出大腸埃希菌.若平板上生長的菌落與表所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似,應(yīng)進行分離,化,染色鏡檢和適宜的生化試驗,確認為大腸埃希菌.
大腸菌形態(tài)特征
用曙紅亞甲藍培養(yǎng)基:呈紫黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色,菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心,圓形,稍凸起,邊緣整齊,表面光滑,濕潤,常有金屬光澤